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【Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的___(结构】
更新时间:2024-04-20 02:51:49
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问题描述:

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的___(结构).

(2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的___设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有___酶的酶切位点.

(3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的___,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.

黄继雄回答:
  (1)核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中,所以实验前要去除卵母细胞的细胞核.(2)步骤③中,根据Rag2基因的核苷酸序列设计引物并扩增Rag2基因片段.基因工程中构建基因表达载体时,应用同种限制酶切割含有...
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